Identificazione delle principali componenti del veleno di Toxoneuron nigriceps integrando un approccio trascrittomico e proteomico. Toxoneuron nigriceps (V.) (Hymenoptera: Braconidae) è un endoparassitoide di stadi larvali di Heliothis virescens (F.) (Lepidoptera: Noctuidae). Al momento dell’ovideposizione, la femmina inietta nel corpo dell'ospite il veleno e il fluido del calice ovarico, un secreto denso contenente proteine ovariche e un polydnavirus del genere bracovirus (TnBV). Queste secrezioni materne, insieme a fattori embrionali, i teratociti, cellule derivanti dalla dissociazione della serosa, sono responsabili delle principali alterazioni fisiologiche osservate a carico dell’ospite, al fine di garantire un ambiente adeguato per lo sviluppo del parassitoide. Uno dei fattori chiave coinvolti nella regolazione dell’ospite, da parte del parassitoide, sembrerebbe essere il veleno. Ad oggi il ruolo del veleno di T. nigriceps risulta poco conosciuto, sebbene le informazioni preliminari indichino un coinvolgimento nella soppressione della risposta immunitaria. Le principali componenti del veleno di T. nigriceps sono state identificate mediante un approccio combinato di trascrittomica e proteomica. Il trascrittoma delle ghiandole del veleno è stato realizzato de novo mediante RNAseq e risulta costituito da 17742 contigs. Le sequenze sono state analizzate con il software Blast2GO fornendo un quadro completo delle putative proteine presenti nel veleno e le relative informazioni sulle funzioni molecolari, sui processi biologici e sui putativi compartimenti cellulari. L’analisi proteomica è stata condotta sulle componenti del veleno, mediante separazione per elettroforesi bidimensionale, escissione e digestione triptica degli spots e successiva analisi di spettrometria di massa tandem (HPLC-MS/MS). Il software MASCOT, ha consentito di incrociare le peak-list sperimentali con i dati di trascrittomica, permettendo di identificare numerose putative proteine presenti nel veleno di T. nigriceps. L’identificazione molecolare e la successiva caratterizzazione di queste molecole saranno essenziali per comprendere il ruolo svolto da ciascun componente nell’induzione e nella regolazione della sindrome patologica osservata negli ospiti parassitizzati, contribuendo a chiarire l'azione e l’interazione di tutti i fattori parassitari sia di origine materna che embrionale.

XXV CONGRESSO NAZIONALE ITALIANO DI ENTOMOLOGIA

LAURINO, SIMONA;GROSSI, GERARDA;SALVIA, ROSANNA;BUFO, Sabino Aurelio;BIANCO, Giuliana;FALABELLA, Patrizia
2016-01-01

Abstract

Identificazione delle principali componenti del veleno di Toxoneuron nigriceps integrando un approccio trascrittomico e proteomico. Toxoneuron nigriceps (V.) (Hymenoptera: Braconidae) è un endoparassitoide di stadi larvali di Heliothis virescens (F.) (Lepidoptera: Noctuidae). Al momento dell’ovideposizione, la femmina inietta nel corpo dell'ospite il veleno e il fluido del calice ovarico, un secreto denso contenente proteine ovariche e un polydnavirus del genere bracovirus (TnBV). Queste secrezioni materne, insieme a fattori embrionali, i teratociti, cellule derivanti dalla dissociazione della serosa, sono responsabili delle principali alterazioni fisiologiche osservate a carico dell’ospite, al fine di garantire un ambiente adeguato per lo sviluppo del parassitoide. Uno dei fattori chiave coinvolti nella regolazione dell’ospite, da parte del parassitoide, sembrerebbe essere il veleno. Ad oggi il ruolo del veleno di T. nigriceps risulta poco conosciuto, sebbene le informazioni preliminari indichino un coinvolgimento nella soppressione della risposta immunitaria. Le principali componenti del veleno di T. nigriceps sono state identificate mediante un approccio combinato di trascrittomica e proteomica. Il trascrittoma delle ghiandole del veleno è stato realizzato de novo mediante RNAseq e risulta costituito da 17742 contigs. Le sequenze sono state analizzate con il software Blast2GO fornendo un quadro completo delle putative proteine presenti nel veleno e le relative informazioni sulle funzioni molecolari, sui processi biologici e sui putativi compartimenti cellulari. L’analisi proteomica è stata condotta sulle componenti del veleno, mediante separazione per elettroforesi bidimensionale, escissione e digestione triptica degli spots e successiva analisi di spettrometria di massa tandem (HPLC-MS/MS). Il software MASCOT, ha consentito di incrociare le peak-list sperimentali con i dati di trascrittomica, permettendo di identificare numerose putative proteine presenti nel veleno di T. nigriceps. L’identificazione molecolare e la successiva caratterizzazione di queste molecole saranno essenziali per comprendere il ruolo svolto da ciascun componente nell’induzione e nella regolazione della sindrome patologica osservata negli ospiti parassitizzati, contribuendo a chiarire l'azione e l’interazione di tutti i fattori parassitari sia di origine materna che embrionale.
2016
978-88-942065-0-0
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